篇一：發酵現象(初中生物實驗)
創新實驗目的：
探究酵母菌在無氧條件下發酵作用產生二氧化碳和酒精。
實驗儀器及用品：
1.實驗儀器：帶膠塞和膠管的錐形瓶、小氣球、Y形管、大燒杯、溫度計、試管、比色板、小燒杯、玻璃棒。
2.實驗用品: 白糖（100g）、一小包干酵母（約30g）、澄清的石灰水、酒精、橙色的重鉻酸鉀溶液。（檢測酒精的試劑。0.5ml的濃硫酸溶有0.1g重鉻酸鉀，體積分數為95％—97％，在酸性條件下與酒精發生化學反應由橙色變為灰綠色）
實驗裝置及說明：
澄清的石灰水可以檢測氣體中有二氧化碳，重鉻酸鉀溶液遇到酒精由橙色變為灰綠色。 實驗操作：
1.將（100ml）40℃溫水倒入錐形瓶，再用湯匙將一大勺糖及適量干酵母加進來，攪拌均勻后，將錐形瓶放在大燒杯中水浴保溫溫度保持在30—40 ℃左右。（先讓酵母菌進行有氧呼吸，是酵母菌迅速繁殖，并把葡萄糖分解成二氧化碳和水。）
2. 觀察到酵母菌培養液有氣泡產生，塞上橡膠塞（這樣做既可以避免氣體散失，影響后面實驗效果，也為酒精的產生提供保障）。過一段時間后就可看到干癟的氣球慢慢膨脹起來了。（酵母菌的無氧呼吸）
3.將夾子打開，擠壓氣球，使瓶內產生的氣體徐徐通過膠管導入試管內的澄清石灰水中，石灰水變渾濁了(檢測氣體中有二氧化碳。原理：二氧化碳遇石灰水，石灰水變渾濁)。
4.將重鉻酸鉀試劑分別滴在比色板的凹槽內，并分別標注1號、2號（作對照）、3號。在3號試劑上滴1滴酒精，在1號試劑上滴1滴酵母菌發酵液。發現1號和3號都由橙色變成了灰綠色。
實驗創新點及意義：
通過上述實驗，讓我們對酵母菌“發酵現象”所需要的原料、
條件及產生的物質都有了較直觀的感受，比較容易理解課本上闡述的 “酵母菌可以把葡萄糖轉化為酒精和二氧化碳”等有關內容，而且印象深刻。使我們養成很好的節約意識。
實驗現象：
1. 聞到了發酵后特殊的甜酒的芳香氣味。
2. 詳見【實驗操作4】
3. 澄清的石灰水變渾濁
篇二：發酵實驗報告
實驗一 搖瓶發酵法制備糖化酶
一、實驗目的
（1）掌握搖床發酵法制備糖化酶的工藝流程及操作方法
（2）了解利用黑曲霉菌菌種發酵時的生長條件及注意事項
（3）熟練掌握實驗過程中的無菌操作和培養條件的選擇
二、實驗儀器及試劑
菌種：黑曲霉
儀器：錐形瓶（500ml)、移液管、恒溫水浴鍋、秒表、50mL比色管、牛皮紙、紗布（8層）、pH計。
藥品：三水乙酸鈉、冰醋酸、硫代硫酸鈉、碘、氫氧化鈉、硫酸、可溶性淀粉、玉米粉、豆餅粉、麩皮
三、實驗原理
搖瓶發酵是實驗室常用的通風發酵方法，通過將裝有液體發酵培養基的搖瓶放在搖床上振蕩培養，以滿足微生物生長、繁殖及產生許多代謝產物對氧的需求。它是實驗室篩選好氣性菌種，以及摸索種子培養工藝與發酵工藝的常用方法。
葡萄糖淀粉酶（EC3.2.1.3）系統名為淀粉α-1,4-葡聚糖葡萄糖水解酶，俗稱糖化酶，是國內產量最大的酶品種。糖化酶對淀粉分子的作用是從非還原末端切開α-1,4鍵，也能切開α-1,3鍵和α-1,6鍵，產生葡萄糖。
糖化酶有催化淀粉水解的作用，能從淀粉分子非還原末端開始，分解α-1,4-葡萄糖苷鍵生成葡萄糖。葡萄糖分子中含有醛基，能被次碘酸鈉氧化，過量的次碘酸鈉酸化后析出碘，再用硫代硫酸鈉標準溶液滴定，計算酶活力。
四、實驗步驟
1.培養步驟
1.1種子培養基制備及滅菌
將新鮮土豆去皮切塊，稱取200~300 g土豆塊放入500 mL燒杯中，加入一定量水，在電爐上煮沸至土豆塊熟透，用120目紗布過濾，濾渣反復用一定量水清洗、過濾2次，合并各次濾液且定容至1000 mL即得土豆汁。取一定體積的土豆汁，在其中加入5%的蔗糖，溶解搖勻并調pH至5.5，即得種子培養基。將適量種子培養基倒入錐形瓶（250ml），用紗布塞塞住管口，并用牛皮紙包扎，置滅菌鍋中，于121℃下滅菌30min。待滅菌完畢，冷卻取出。
1.2發酵培養基制備及滅菌
取6只500mL搖瓶，分別按裝液量100、200、300mL配制培養基（玉米粉6%、豆餅粉2%、麩皮1%），加水后稍微搖動，使原料濕潤，浸入水中。用8層紗布包扎瓶口，再加牛皮紙包扎。置滅菌鍋中，于121℃下滅菌30min。
1.3發酵培養基接種：將已生長好的菌種，在無菌條件下，按照10%的接 量（8%-12%）接種到發酵培養基上。
1.4發酵培養基發酵：將搖瓶固定在搖床上，培養溫度為31℃，轉速為120r/min，培養時間96h。顯微鏡觀察菌絲形態，用試紙測發酵液pH，測定酶活力。搖瓶培養時觀察各種搖瓶機的結構。
2.糖化酶活力測定
2.1待測酶液的制備：
精確吸取液體酶1.00mL，先用少量的乙酸緩沖液溶解，并用玻璃棒搗研，將上清液小心傾入容量瓶中。沉渣部分再加入少量緩沖液，最后全部移入容量瓶中，用緩沖液定容至刻度（估計酶活力在100~250u/mL范圍內），搖勻。通過4層紗布過濾，濾液供測定用。
2.2酶活力測定：
于甲、乙兩支50mL比色管中，分別加入可溶性淀粉溶液25mL及緩沖液5mL，搖勻后，于40℃恒溫水浴中預熱5min。在甲管（樣品）中加入待測酶液2mL，立刻搖勻，在此溫度下準確反應30min，立刻各加入氫氧化鈉溶液0.2mL，搖勻，將兩管取出迅速冷卻，并于乙管（空白）中補加待測酶液2mL。吸取上述反應液與空白液各5mL，分別置于碘量瓶中，準確加入碘溶液10mL，再加氫氧化鈉溶液15mL，搖勻塞緊，于暗處反應15min。取出，加硫酸溶液2mL，立即用硫代硫酸鈉標準液滴定，直至藍色剛好消失為其終點。
2.3酶活力計算：
樣品酶活力（u/g或u/mL）=579.9×(A-B)c×n式中：A與B分別為空白、樣品消耗硫代硫酸鈉標準溶液的體積，mL；c為硫代硫酸鈉標準溶液的濃度，mol/L；n為稀釋倍數。
五、數據分析
比較不同裝液量下的菌體形態特征、酶活力，將結果填入下表：
裝液量/mL
指標
酶活力
pH
菌體特征 100 420u/mL 4.2 200 510u/mL 4.1 300 570u/mL 3.8 出現球狀的白色的菌絲團，瓶壁上出現黑絲的孢子和菌絲
六、 結論
1.不同的裝液量對酶活力的影響是隨著裝液量的`增加呈現上升的趨勢，但是酶活力變化不大，并且酶活力不高，與其他組數據相比接種量跟酶活力關
2.菌體特征在錐形瓶的瓶壁上出現白色的菌絲，在培養基中也出現了絲球
3.菌種新陳代謝的旺盛二氧化碳的釋放增加，使pH值逐漸下降，最終使培養基的pH下降至3.8左右。
實驗二 釀酒酵母發酵過程參數的測定及計算
一、實驗目的
1.測定并繪制生長曲線、底物消耗曲線和產物形成曲線
2.了解發酵過程中葡萄糖的利用、菌體生長和產物生成的相互關系
3.初步學會菌體生長、底物消耗和產物生成有關發酵參數的求解
二、實驗儀器及試劑
菌種：釀酒酵母
儀器：錐形瓶（250ml）、移液管、pH計、生物傳感儀、分析天平
藥品：酵母膏、胰蛋白胨、葡萄糖、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、苯甲酸鈉、EDTA鈉、氯化鈉
三、實驗原理
酵母菌是兼性厭氧型真菌，喜歡含糖的環境， 有氧時將葡萄糖分解成CO和水，無氧時將葡萄糖分解成酒精和二氧化碳，同時都釋放出能量
生物傳感器由生物識別元件和信號轉換器組成，能夠選擇性地對樣品中的待測物發出相應，通過生物識別系統和電化學或其他傳感器把待測物質的濃度轉為電信號，根據電信號的大小定量測出待測物質的濃度。生物傳感器是應用生物活性材料（如酶、蛋白質、DNA、抗體、抗原、生物膜等）與物理或化學換能器有機結合的一門交叉學科，是發展生物技術必不可少的一種先進的檢測方法與監控方法，也是物質在分子水平的快速、微量分析方法
四、 實驗步驟
1.種子培養基（YEPD，g/L）：稱取酵母膏10g、胰蛋白胨20g、葡萄糖20g，加蒸餾水溶解，調節pH 5.0左右，并定容至1000ml。
2.發酵培養基（g/L）：稱取酵母膏10g，胰蛋白胨20g，葡萄糖100g加蒸餾水溶解，調節pH 至5.0左右，定容至1000ml，分裝10個錐形瓶（250ml）封口121℃，30min滅菌。
3.種子培養：將活化好的種子培養液，用移液管移去10ml接種于滅菌YEPD液體培養基中， 于30℃、120 r/min全溫搖瓶柜中培養24 h左右，觀察種子液的色澤、氣味與形態等基本情況。
4.發酵方法：將培養好的種子液按8-12%的接種比例，接種于發酵培養基中，置于30 ℃、120 r/min全溫搖瓶柜中培養96 h。
5.過程取樣：發酵培養基接種發酵后，每隔8小時取樣，移取45ml菌液至離心試管中3800r/min離心，上清液取出分析，菌泥放置烘箱烘干，分析菌體生物量、殘余葡萄糖濃度與酒精生成量，并以此為基礎數據計算參數
6.生物量的測定：取等量的兩份發酵液，一份由烘干法測得菌體干重（DCW），另一份稀釋成一定的濃度于630 nm下測定吸光值（OD值），得到標準曲線為DCW=3.87×OD（R=0.996）。再以相同方法測得樣品的OD值，按標準曲線計算出菌體干重。
7.還原糖的測定與乙醇的測定：使用生物傳感儀測定糖類和酒精的含量
五、 數據分析
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